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Facoltà di Scienze Matematiche Fisiche e Naturali >
Tesi di dottorato in scienze matematiche e fisiche >
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http://hdl.handle.net/2108/563
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Full metadata record
| DC Field | Value | Language |
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| contributor.advisor | Ramoni, Carlo | - |
| contributor.author | Cecchetti, Serena | - |
| date.accessioned | 2008-07-28T11:00:09Z | - |
| date.available | 2008-07-28T11:00:09Z | - |
| date.issued | 2008-07-28T11:00:09Z | - |
| identifier.uri | http://hdl.handle.net/2108/563 | - |
| description.abstract | Lo scopo di questo lavoro di tesi è quello di ampliare le conoscenze
sulla biologia delle cellule Natural Killer umane, una sottopopolazione
linfocitaria del sangue periferico protagonista dell’immunità innata
grazie alla sua abilità nel lisare cellule bersaglio in assenza di una
precedente stimolazione ed in modo non ristretto al complesso
maggiore di istocompatibilità. In particolare, in questa tesi l’attenzione
è stata rivolta sull’enzima fosfolipasi C, specifico del ciclo della
fosfatidilcolina (PC-PLC), responsabile della produzione di
diacilglicerolo e fosfocolina. E’ stata evidenziata, sulla membrana
plasmatica delle cellule NK, una correlazione diretta tra i livelli di
espressione dell’enzima PC-PLC e quelli del recettore CD16. Inoltre,
è stato dimostrato come, a seguito di ingaggio con il suo anticorpo
specifico, il CD16 vada incontro ad un processo di internalizzazione,
indipendente dall’ATP come fonte energetica, ma citoscheletrodipendente,
cui segue una degradazione e una ri-espressione sulla
membrana plasmatica delle cellule NK. La stimolazione del recettore
induce un significativo incremento nell’attività enzimatica della PCPLC,
entro 10 minuti dalla stimolazione. Inoltre, analisi più dettagliate
della distribuzione dei due antigeni sulla membrana plasmatica hanno
evidenziato la presenza sia della PC-PLC che del CD16 a livello dei
microdomini di membrana. Dagli esperimenti di citofluorimetria a
flusso si evince come la regolazione esercitata dall’enzima PC-PLC
sul CD16 sia un fenomeno altamente specifico. Infatti, gli studi
effettuati utilizzando l’inibitore dell’enzima PC-PLC, D609,
dimostrano che il recettore CD16 è l’unico ad essere fortemente
down-modulato dalla superficie cellulare, tra i vari recettori presenti
sui linfociti del sangue periferico umano. Ne consegue che l’attività
citotossica CD16-mediata risulta essere completamente abolita in
presenza dell’inibitore. Questi dati suggeriscono che l’enzima PCPLC
potrebbe svolgere un ruolo chiave nella regolazione
dell’espressione del recettore CD16 sulla membrana plasmatica delle
cellule NK, sui meccanismi litici CD16-mediati e nella cascata di
trasduzione del segnale innescata dalla stimolazione del recettore
stesso. | en |
| description.abstract | CD16, the low-affinity FcIgG receptor (FcgammaRIIIA), is
predominantly expressed in human NK cells. Our recent findings
indicate that CD16 expression on the outer membrane surface of NK
cells is correlated with the membrane expression of
phosphatidylcholine-specific phospholipase C (PC-PLC), responsible
for the production of diacylglycerol and phosphocholine. In the
present work we analyse the trafficking of CD16 from the plasma
membrane to cytoplasmic regions, after stimulation with specific
mAb. The CD16 receptor is internalized, likely degraded and newly
synthesized; its endocytosis is independent of ATP, but requires an
integral and functional actin cytoskeleton. Antibody-mediated CD16
cross-linking results in an approximately twofold increase in PC-PLC
enzymatic activity within 10 minutes. Analysis of PC-PLC and CD16
distribution in NK cell plasma membrane demonstrates that the
proteins are physically associated and partially accumulated in lipid
rafts. Pre-incubation of NK cells with a PC-PLC inhibitor, D609,
determines a dramatic decrease both in CD16 receptor and PC-PLC
enzyme expression on the plasma membrane. Interestingly, among
phenotype PBL markers, only CD16 is strongly down-modulated by
D609 treatment. CD16-mediated cytotoxicity is also reduced after
D609 incubation. Taken together, these data suggest that the PC-PLC
enzyme could play an important role in regulating CD16 membrane
expression, the CD16-mediated cytolytic mechanism and CD16-
triggered signal transduction. | en |
| format.extent | 4357 bytes | - |
| format.extent | 10789 bytes | - |
| format.extent | 20170982 bytes | - |
| format.extent | 340758 bytes | - |
| format.mimetype | application/pdf | - |
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| format.mimetype | application/pdf | - |
| language.iso | en | en |
| subject | cellule natural killer | en |
| subject | recettori specifici per il frammento Fc delle Ig (FcR) | en |
| subject | attivazione cellulare | en |
| subject | mediatori lipidici | en |
| subject | citotossicità | en |
| subject | Natural Killer cells | en |
| subject | FcR Receptors | en |
| subject | cell activation | en |
| subject | cytotoxicity | en |
| subject | lipid mediators | en |
| subject.classification | MED/04 Patologia generale | en |
| title | La fosfolipasi C specifica per fosfatidilcolina nelle cellule Natural Killer: studio degli aspetti funzionali e del traffico recettoriale del CD16 | en |
| type | Doctoral thesis | en |
| degree.name | Dottorato in immunologia | en |
| degree.level | Dottorato | en |
| degree.discipline | Facoltà di Scienze Matematiche Fisiche e Naturali | en |
| degree.grantor | Università degli studi di Roma Tor Vergata | en |
| date.dateofdefense | A.A. 2007/2008 | en |
| Appears in Collections: | Tesi di dottorato in scienze matematiche e fisiche
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Description |
Size | Format |
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| Abbreviazioni.pdf | Abbreviations and keywords | 4Kb | Adobe PDF | View/Open | | sommario.pdf | Abstracts | 10Kb | Adobe PDF | View/Open | | Figure tesi.pdf | Images | 19698Kb | Adobe PDF | View/Open | | Tesi.pdf | Thesis | 332Kb | Adobe PDF | View/Open |
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